تولید یونجه های تراریخته مقاوم به سرخرطومی یونجه ‭((Hypera postica ‬از طریق اگروباکتریوم

نوع محتوی: طرح پژوهشی
زبان: فارسی
استان موضوع گزارش: البرز
شهر موضوع گزارش: کرج
شناسه ملی سند علمی: R-1093490
تاریخ درج در سایت: 27 بهمن 1397
دسته بندی علمی: علوم کشاورزی
مشاهده: 188
تعداد صفحات: 107
سال انتشار: 1390

نسخه کامل طرح پژوهشی منتشر نشده است و در دسترس نیست.

  • من نویسنده این مقاله هستم

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این طرح پژوهشی:

چکیده طرح پژوهشی:

به منظور تولید گیاهچه یونجه تراریخته مقاوم به آفت سر خرطومی از سویه های اگروباکتریوم ‭LBA‬‮‭4404‬، ‭AGL‬‮‭01‬ ‭GV‬‮‭3101‬و پلاسمید‭pBI‬‮‭121‬استفاده شد. به منظور تهیه پلاسمید حاوی ژن ‭pBI‬‮‭121‬‭-cry‬3‭a ‬، ابتدا قطعه ‮‭1800‬ جفت بازی ژن ‭cry‬3aبا آنزیم های برشی‭BamHI‬و‭Sac‬1 جدا شده و در مکان برشی مشابه در ناقل دوتایی‭pBI‬‮‭121‬ همسانه سازی شد. بدین ترتیب، این قطعه الحاقی در پایین دست پیشبر ذاتی‮‭35‬Sویروس موزاییک گل کلم در ‭pBI‬‮‭121‬قرار گرفت. ریزنمونه های برگ و دمبرگ با سوسپانسیون باکتری حاوی پلاسمید نوترکیب تلفیح شد و در محیط کشت کالوسزا همکشت شدند. رویان های بدنی پس از جوانه زنی به محیط باززایی منتقل شدند.آنالیز‭RPC ‬و سادرن بلات تلفیق ژن را در گیاهان تراریختهه مورد تایید قرار داد. گیاهان تولید شده همگی بارور بودند و هیچ نوع غیرطبیعی بودن در رشد ونمو و سایر صفات آنها مشاهده نگردید. تجزیه الیزا تظاهر پروتیین ‭Cry‬3‭a ‬را در گیاهان تراریخته نشان داد. آزمایشهای متعددی که توسط لارو های سرخرطومی یونجه بر روی یونجه های تراریخته نسل اول صورت گرفت نشان داد که این گیاهان مقاومت بالایی نسبت به شاهد در مقابل این آفت که مهمترین آفت زراعت یونجه ایران بشمار می رود دارا می باشند. واژه های کلیدی:آگروباکتریوم، زیست سنجی لارو ‭Hyperapostica ‬یونجه تراریخته‭Bt ‬مقاومت.