اثر سیتوتوکسیک و آپوپتوتیک عصاره جلبک دریایی قرمز Ceramium flaccidum علیه سلول های سرطانی کولورکتال

مقدمه و هدف: امروزه تحقیق در راستای یافتن ترکیباتی با خواص ضد سرطانی که توانایی جلوگیری از گسترش و رشد سلولهای سرطانی را داشته باشد مورد توجه است و با توجه به عوارض جانبی ترکیبات صناعی و داروهای فارماکولوژیک ضد سرطان محققان در راستای یافتن ترکیبات طبیعی با خواص ضد سرطانی بوده اند و در این میان آبزیان دریایی بواسطه فراوانی و تنوع بسیار بالای آن ها همواره مورد توجه قرار گرفته اند (۲۰۰۶ Athukorala., et al.,). امروزه سرطان کولورکتال مقام سوم مرگ جهانی را دارد ( ,.Kim et al۲۰۱۰). لذا یافتن مواد ضد سرطان با منشاء دریایی از جمله ماکرو جلبک ها مورد توجه است (۲۰۱۱ ,.Derakhshesh et al). در این تحقیق، خواص ضد سرطانی برون تنی عصاره های آلی جلبک قرمز دریاییCeramium flaccidum سواحل چابهار مورد بررسی قرار گرفت. روش تحقیق: جلبک از ساحل رمین جمع آوری، شستشو و در سایه خشک شد. ۵۰ گرم پودر خشک درون ارلن مایر با متانول، اتیل استات و هگزان به مدت ۴۲ ساعت خیسانده شد و با کاغذ صافی واتمن ۱ صاف شد. عصارههای تغلیظ شده توسط فیلتر میکروبی ۲۲ /۰ میکرون استریل شد (۲۰۱۰, .Srivastava et al). سلول های سرطانی کولورکتال (HT-۲۹) از موسسه واکسن و سرم سازی رازی تهیه شد و در محیطRPMI۱۶۴۰ به همراه سرم جنین گاوی (۰۱%) و ۱cc پن استرپ در انکوباتور دی اکسید کربن با ۵% ۲CO در دمای ۷۳ درجه سانتی گراد کشت داده شد و سپس با غلظت های مختلف عصاره (۰۱ /۱۰ ، /۰ و ۱ mg/mL) تیمار شدند. سلول های سالم Vero نیز جهت مقایسه به کار رفت. از روشMTT (۳-(۴ و ۵- دی متیل تیازول ۲-ایل)-۲ و ۵- دی فنیل تترازولیوم بروماید) جهت بررسی اثر سیتوتوکسیک در پلیتهای ۶۹ خانه در ۶۳۰-۵۷۰ نانومتر با استفاده از دستگاه الایزاریدر و از فلوسایتومتری برای سنجش قابلیت آپوپتوتیک عصاره ها استفاده شد (۲۰۱۰ ,.Van Dloosdrecht et al., ۱۹۹۴; Khanavi et al). همچنین بهترین عصاره با GC-Ms-Ms مورد ارزیابی قرار گرفت. آزمون آنالیز واریانس یک طرفه و آزمون تعقیبی توکی جهت بررسی آماری به کار رفت. یافته ها: مرگ سلول های سرطانی کولورکتال در غلظت بالای ۱ /۰ mg/mL نسبت به شاهد معنی دار بود (۰۵ /۰سیتوتوکسیک را نشان داد. بررسی فلوسایتومتری نشان داد که عصاره هگزانی بالاترین درصد آپوپتوز اولیه و نکروزیس را نسبت به دو عصاره دیگر علیه سلول های سرطانی کولورکتال دارد (۰۵ /۰جلبک در غلظت یکmg/mLدارای اثرات سیتوتکسیک و آپوپتوتیک قوی می باشد. پس از هگزان عصاره متانولی نیز خواص خوبی نشان داد. عصاره ها روی سلول های سالمVeroتاثیر معنی دار نداشتند و می توانند به عنوان داروی بالقوه ضد سرطانی مورد بررسی بیشتر قرار گیرند. هگزان یک ترکیب غیر قطبی است و نشان می دهد ترکیبات دارای خواص ضدسرطانی جلبک مورد مطالعه بیشتر از نوع غیر قطبی می باشد. وجود ترکیبات استرولی با درصد بالا در عصاره هگزانی و متانولی امکان وجود ساختار استرولی در ترکیبات ضد سرطان عصاره های جلبک قرمزCeramium flaccidumرا تقویت می کند اما نیاز به مطالعات تکمیلی پیش کلینیکی برای ارزیابی خواص دارویی به عنوان عامل ضد سرطان دارد

کلیدواژه ها:

جلبک ، سیتوتوکسیک ، آپوپتوتیک ، نکروزیس ، فلوسایتومتری